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        臨床應用

        Clinical application

        PCR是如何將新冠病毒檢測出來的?
        作者:博日科技 時間:2020-03-11 10:35:53 瀏覽數:4569

        2020年初,新冠肺炎來襲,人類正在經歷著歷史上最大的浩劫。新冠肺炎發生初期,大部分人不知道這是一種類似2003年非典型性肺炎病毒入侵,直到生物學、細胞學、病毒學等專家利用儀器和專業判斷確認了這次肺炎正是一種以新型冠狀病毒命名的病毒性肺炎。至此,人們對此次病毒的臨床治療才有了突破性的發展。

        那么,新型冠狀病毒是如何被檢測查出來的?

        1、 新冠病毒的檢測流程

        眾所周知,新冠病毒有14天左右的潛伏期,因此最有效的方法即是對密切接觸者以及有新冠肺炎癥狀的疑似患者進行病毒核酸檢測,將傳染杜絕于起始才是保護健康人群最有力的方法。

        疑似患者將被采取咽拭子樣本,送到檢驗醫學中心,實驗室內會為核酸檢測準備4個區域,分別是試劑準備區、樣本準備區、擴增區、擴增產物分析區。

        其中試劑準備區負責接收患者樣本,樣本準備區則負責進行對樣本的核酸進行提取,擴增區則是擴增復制核酸樣本,擴增后分析區就是分析樣本內核酸能能否與標準樣配對,通過儀器檢測的到,就判斷成陽性,如果檢測不到就是陰性。

        PCR(聚合酶鏈式反應)實驗室又叫基因擴增實驗室,是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別,精確檢測新型冠狀病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。

        2、新冠病毒是如何被檢測為陽性的?

        如上所說,疑似患者被采集了咽拭子樣本之后,將利用PCR進行試驗分析。具體原理通俗的講是這樣的。

        “新冠病毒陽性”要確認這一點,必須從樣本(比如痰、汗液、血液、糞便等等)里提取出完整的病毒。在這次疫情暴發之初,我們有聽到一些新聞所謂“分離出病毒株”,大概指的就是這個。這個操作挺麻煩的,并且不是每一次都能分離成功。只能作為“確實有病毒在這里”的絕對證據。但作為給患者的檢測,既慢,又不夠準確。因此,現在我們聽到更多的,是“新冠病毒核酸檢測陽性”。所謂“新冠病毒核酸檢測陽性”,又是怎么來的呢? 首先,提取樣本。就是把痰啊、咽拭子采到的東西啊、糞便啊等等,先想辦法收起來,拿到實驗室把樣本里面的核酸(就新冠病毒而言,指RNA)提取出來。RNA提取之后,降解速度非???。因此,其實我們需要把RNA再對應的轉成為cDNA。接下來的過程,本質叫做PCR(聚合酶鏈式反應)。大致意思就是用特別的標簽,把新冠病毒最特征的那一段信息(原本是RNA信息,此時已經對應轉換成為cDNA信息)給識別出來。不只是識別,這個過程是在識別的基礎上,反復的復制這一段。那么經過一段時間,原來在樣本里只有一點點的信息,就被擴增到很多了,也就容易查到了。

        檢測用到的,叫做realtimePCR。就是說病毒的核酸信息每一次被復制都會被記錄下來。這樣檢測更準確。并且,理論上說,甚至可以推斷出樣本里面的病毒核酸的密度。如果樣本里面沒有病毒核酸,那么那個尋找病毒信息的標簽,就永遠也找不到落點。這時候當然不可能有任何東西被復制出來,那么檢測結果就是陰性。如果樣本里面有病毒核酸,那么標簽就可以找到它,并且復制它,然后發出信號告訴檢測者:這里有病毒。這,就是核酸檢測陽性。

        3、假陰性是怎么回事?

        還有一種情況,很多患者被試驗初期出現假陰性的情況,即實驗出現了偏差。如果標簽的靈敏度不夠,會出現找不到病毒核酸的情況。這也會造成檢測的假陰性。 某些患者檢測若干次都是陰性,最后才發現是陽性,簡單來說,就是有可能是取樣的時候沒有取到病毒最多的地方,或者當時患者體內的病毒確實不多,或者檢測的試劑靈敏度不夠。

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